病原真菌的診斷一直是臨床檢查中的一項(xiàng)難題,由于其獨(dú)特的細(xì)胞結(jié)構(gòu),并且早期感染無(wú)明顯癥狀,導(dǎo)致其在檢驗(yàn)診斷中有一定困難,而由真菌感染所導(dǎo)致的疾病死亡率也逐漸上升,如何對(duì)病原真菌進(jìn)行快速檢測(cè)對(duì)病原真菌感染的治療有著重要意義。
目前真菌的檢測(cè)方法有:涂片鏡檢、真菌培養(yǎng)、分子生物學(xué)、特異性標(biāo)志物和抗體檢測(cè),而培養(yǎng)法是真菌鑒定分類(lèi)的金標(biāo)準(zhǔn),但其培養(yǎng)周期長(zhǎng)、診斷滯后,對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員有特殊要求。
近期,江西省胸科醫(yī)院病理科引進(jìn)了新近發(fā)展的真菌免疫熒光染色診斷項(xiàng)目。它是一種新型的染色技術(shù),其染色液中的熒光增白劑是一種熒光染料,與多種植物以及真菌細(xì)胞壁的幾丁質(zhì)和纖維素均具有較強(qiáng)的親和力,在特定的紫外光下(350~400 nm)能夠發(fā)出亮藍(lán)色熒光,通過(guò)熒光顯微鏡觀(guān)察其形態(tài)可達(dá)到檢測(cè)真菌的目的。
真菌熒光染色診斷的優(yōu)勢(shì)在于,真菌結(jié)構(gòu)在熒光顯微鏡下發(fā)出特殊的熒光而易于尋找、辨認(rèn),縮短了標(biāo)本鏡檢時(shí)間,達(dá)到快速診斷的目的。有文獻(xiàn)報(bào)道熒光染色可使標(biāo)本鏡檢時(shí)間縮短到30-60秒,10%KOH濕片平均鏡檢時(shí)間為3分鐘。
最近病理科接到了一例手術(shù)病例,該病例快速診斷就受益于此項(xiàng)目的開(kāi)展。患者于12月16日行右上肺部分切除術(shù),并行術(shù)中快速冰凍檢查,標(biāo)本送至病理科,經(jīng)過(guò)標(biāo)本核對(duì)--登記--記錄--取材--切片--染色--診斷等常規(guī)操作程序,科主任劉翼軍鏡下觀(guān)察診斷考慮肉芽腫性炎,部分組織細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)少量孢子體,考慮真菌感染。為明確診斷,劉主任立即下達(dá)醫(yī)囑,加做免疫熒光真菌染色,因冰凍診斷具時(shí)限性(30分鐘內(nèi)需出具報(bào)告),技術(shù)組組長(zhǎng)農(nóng)雪萍迅速進(jìn)行組織切片及免疫真菌熒光染色,在2分鐘內(nèi)制作出組織免疫熒光片。劉主任在熒光顯微鏡下即刻診斷,真菌孢子體在熒光顯微鏡下栩栩如生,病理最終診斷呼之欲出:真菌感染性肉芽腫性炎,符合新型隱球菌感染,快速、準(zhǔn)確地為臨床提供了明確的診斷。
冰凍HE
真菌熒光染色
冰凍報(bào)告
病理是一門(mén)形態(tài)科學(xué)。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,病理醫(yī)生可以通過(guò)多種手段去證實(shí)病理形態(tài),這正是病理學(xué)科的進(jìn)步——讓形態(tài)指引診斷方向,用證據(jù)來(lái)明確診斷。北京協(xié)和醫(yī)院病理科鐘定榮教授說(shuō):“這是進(jìn)步的表現(xiàn),病理診斷的手段越多,診斷的準(zhǔn)確性就會(huì)越高?!?/p>